标准编号:	GB/T 15670.12-2017
中文名称:	农药登记毒理学试验方法 第12部分：短期重复吸入染毒(28天)毒性试验
英文名称:	Toxicological test methods for pesticides registration―Part 12:Short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study
中标分类:	B17    农药管理与使用方法
行业分类:	GB    国家标准
ICS分类:	65.100 65.100    杀虫剂和其他农用化工产品 65.100
发布机构:	中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会
发布日期:	2017-07-12
实施日期:	2018-2-1
标准状态:	valid
替代旧标准:	GB/T 15670-1995 农药登记毒理学试验方法
翻译语言:	英文
文件格式:	PDF
中文字符数:	11000 字
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Codeofchina.com is in charge of this English translation. In case of any doubt about the English translation, the Chinese original shall be considered authoritative. GB/T 15670 consists of the following parts under the general title Toxicological test methods for pesticides registration: ——Part 1: General principles; ——Part 2: Acute oral toxicity test - Horn's method; ——Part 3: Acute oral toxicity test - Up-and-down-procedure; ——Part 4: Acute oral toxicity test - Up-and-down-procedure; ——Part 5: Acute dermal toxicity test; ——Part 6: Acute inhalation toxicity test; ——Part 7: Dermal irritation/corrosion test; ——Part 8: Acute eye irritation/corrosion test; ——Part 9: Skin sensitisation test; ——Part 10: Short-term repeated dose 28-day oral toxicity study; ——Part 11: Short-term repeated dose 28-day dermal toxicity study; ——Part 12: Short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study; ——Part 13: Subchronic toxicity study; ——Part 14: Bacterial reverse mutation test; ——Part 15: In vivo mammalian bone marrow polychromatic erythrocyte micronucleus test; ——Part 16: In vivo mammalian bone marrow cell chromosome aberration test; ——Part 17: Mammalian spermatogonial/spermatocyte chromosome aberration test; ——Part 18: Rodent dominant lethal test; ——Part 19: In vitro mammalian cells chromosome aberration test; ——Part 20: In vitro mammalian cell gene mutation test; ——Part 21: Unscheduled DNA synthesis (UDS) test with mammalian liver cells in vivo; ——Part 22: DNA damage and repair/unscheduled DNA synthesis test in mammalian cells in vivo; ——Part 23: Teratogenicity study; ——Part 24:Two-generation reproduction toxicity study; ——Part 25: Acute delayed neurotoxicity test; ——Part 26: Chronic toxicity study; ——Part 27: Carcinogenicity study; ——Part 28: Combined chronic toxicity/carcinogenicity study; ——Part 29: Metabolism and toxicokinetics study. This part is Part 12 of GB/T 15670. This part is developed in accordance with the rules given in GB/T 1.1-2009. This part replaces GB/T 15670-1995 Toxicological test methods of pesticides for registration partly. The following main changes have been made with respect to the part of subacute inhalation toxicity test in GB/T 15670-1995: ——This part is renamed as Short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study; ——The overall structure and format are modified and adjusted; ——Some clauses and subclauses are added or refined (Clauses 1, 2, 3 and 5, 6.1.1, 6.1.2, 6.1.3, 6.1.4, and Clauses 7 and 8); ——The requirements for laboratory animals are modified (see 6.1.5; 10.3 of Edition 1995); ——In the description of the implementation of repeated inhalation exposure, the exposure time is modified to: "unless otherwise specified, inhalation exposure generally is carried out for 28d continuously, with 6h every day and 7d every week. In consideration of the actual work conditions, it is also possible to carry out inhalation exposure for 5d every week" (see 6.2.1.2; 10.6 of Edition 1995). This part was proposed by and is under the jurisdiction of the Ministry of Agriculture of the People's Republic of China. The previous edition of this part is as follows: ——GB/T 15670-1995. Toxicological test methods for pesticides registration - Part 12: Short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study 1 Scope This part of GB/T 15670 specifies the basic principles, methods and requirements of short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study. This part is applicable to short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study performed for pesticides registration. 2 Normative references The following referenced documents are indispensable for the application of this document. For dated references, only the edition cited applies. For undated references, the latest edition of the referenced document (including any amendments) applies. GB 14925 Laboratory animal - Requirements of environment and housing facilities 3 Terms and definitions For the purposes of this document, the following terms and definitions apply. 3.1 short-term repeated dose inhalation toxicity adverse health effect caused by repeated inhalation of the test object for a period less than 10% of the life of laboratory animal 3.2 inhaled dose the amount of test object inhaled per unit body weight of animal, i.e.: (1) where, Dih——the inhaled dose, mg/kg; c——the concentration of the test object in the inhaled gas, mg/L; t——the inhalation duration, min; R——the respiratory rate, times/min; Tv——the tidal volume of the tested animal, L/time; α——the retention coefficient related to the reactivity and solubility of the test object; W——the body weight, kg. 3.3 no observed adverse effect level; NOAEL the highest dose or concentration of the test object with no exposure-related adverse effect observed with the existing technical means or test indexes under the specified test conditions 3.4 lowest observed adverse effect level; LOAEL the lowest dose or concentration of the test object with exposure-related adverse effect observed with the existing technical means or test indexes under the specified test conditions 3.5 cumulative toxicity adverse reaction caused by repeated exposure, which is the result of the continuation of the effect of the test object on sensitive tissues or the increase of the concentration of the test object and/or its metabolites in sensitive tissues 3.6 target organ organ with significant toxic effect caused by the test object. 3.7 aerodynamic equivalent diameter; AD a special term used to describe the size of aerosol particles Comparing aerosol particles of different shapes and densities with spherical particles of different diameters with standard unit density (1.0g/cm3), when both kinds of particles have the same terminal settling velocity, the diameter of the aerosol particles is expressed by the diameter of the standard spherical particles, and is called the aerodynamic equivalent diameter of the aerosol particles, expressed in micrometers (μm). 3.8 mass median aerodynamic diameter; MMAD when the particles smaller than or equal to a certain aerodynamic equivalent diameter (for example, 5μm) account for 50% of the total mass or total weight of an aerosol sample composed of particles of different aerodynamic equivalent diameters, the aerodynamic equivalent diameter of this kind of aerosol particles is the mass median aerodynamic diameter (5μm) of the aerosol sample 3.9 geometric standard deviation; GSD the geometric standard deviation of the aerodynamic equivalent diameter of aerosol particles, which is used to describe the uniformity or dispersion of aerosol particle size. The smaller the geometric standard deviation is, the higher the content of particles of similar size will be, that is, the better the uniformity of aerosol particles is, the lower the dispersion will be. In general, aerosol sample with geometric standard deviation less than or equal to 2 is called monodisperse aerosol 3.10 inhalable diameter aerosol particles with aerodynamic equivalent diameter less than 10μm are usually called inhalable particulate matters, of which the aerodynamic equivalent diameter is referred to as inhalable diameter for short 4 Test purpose Through short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study, the inhalation toxicity characteristics and dose-response relationship of the test object are further understood, and information such as toxicity characteristics, target organs, whether the test object has cumulative toxicity, no observed adverse effect level (NOAEL) and lowest observed adverse effect level (LOAEL) are obtained, so as to provide basis for selection of dose and observation indexes of subchronic and chronic toxicity studies. 5 Test overview The test object is prepared into gaseous, vapor, aerosol or granular suspension with a specific concentration. The tested animal is then repeatedly exposed to it for 28d in a short term by a dynamic exposure system and is then observed for toxic reaction, regularly weighed, has the food intake calculated, and is also subjected to the determination of hematological indexes, blood biochemical indexes and histopathological examination indexes, so as to evaluate the short-term repeated inhalation toxicity of the test object and preliminarily determine the dose and target organ(s) of the test object causing adverse effects in animals. 6 Test methods 6.1 Preparation for test 6.1.1 Test object The test object shall be sample with stable preparation process and conforming to the quality standards, with the name, source, batch number, content (or specification), storage conditions, preparation method, etc. indicated, and the inspection report accompanied. Excipients, solvents or other media adopted shall be provided with batch number, specifications and manufacturer. 6.1.2 Selection of method and preparation for gasification or aerosol preparation of the test object 6.1.2.1 Gaseous test object The test object is mixed with air into a certain concentration through the flowmeter, and then the gas mixture is directly introduced into the exposure cabinet. 6.1.2.2 The volatile liquid test object with lower boiling point After being volatilized by air bubbling or appropriate heating, the test object is mixed with air into the exposure cabinet. 6.1.2.3 Non-volatile liquid test object with high boiling point According to the physical and chemical properties of the test object, the spray method may be selected, or an aerosol generator may be used to prepare liquid aerosol meeting the test requirements, and then the liquid aerosol is mixed with a certain amount of air into the exposure cabinet. 6.1.2.4 Powdery or solid test object The test object is prepared into solid aerosol by an aerosol generator, and is then mixed with a certain amount of air into the exposure cabinet. 6.1.3 Exposure method To perform the short-term repeated dose inhalation toxicity study, dynamic exposure method shall be adopted by continuously and uniformly sending the air containing the test object with a certain concentration into the exposure cabinet with mechanical ventilation device at a ventilation rate of about 12~15 times/h, so as to maintain a relatively stable exposure concentration. The animal is then subjected to inhalation exposure for 6h continuously every day by systemic exposure or nose/head-only exposure. During exposure, the gas for exposure in exposure cabinet shall be distributed evenly, with the oxygen content of not less than 19% and CO2 content of not more than 3%, and shall be maintained at a temperature of (22±3)℃ and a relative humidity of 30%~70% (except for special circumstances, such as vapor exposure). In case of the systemic exposure of the animal, the total volume of laboratory animals shall not exceed 5% of the volume of the exposure cabinet in order to ensure that the air inside the exposure cabinet is stable. Weak negative pressure shall be maintained in the exposure cabinet to prevent the test object from leaking and polluting the surrounding environment. At the same time, attention shall be paid to preventing the test object from exploding.

Foreword I 1 Scope 2 Normative references 3 Terms and definitions 4 Test purpose 5 Test overview 6 Test methods 7 Test results and evaluation 8 Test report

ICS 65.100 B 17 中华人民共和国国家标准 GB/T 15670.12—2017 部分代替GB/T 15670—1995 农药登记毒理学试验方法 第12部分：短期重复吸入染毒(28天) 毒性试验 Toxicological test methods for pesticides registration— Part 12：Short-term repeated dose 28-day inhalation toxicity study 2017-07-12发布 2018-02-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会 发布 前言 GB/T 15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分： ——第1部分：总则； ——第2部分：急性经口毒性试验 霍恩氏法； ——第3部分：急性经口毒性试验 序贯法； ——第4部分：急性经口毒性试验 概率单位法； ——第5部分：急性经皮毒性试验； ——第6部分：急性吸入毒性试验； ——第7部分：皮肤刺激性/腐蚀性试验； ——第8部分：急性眼刺激性/腐蚀性试验； ——第9部分：皮肤变态反应(致敏)试验； ——第10部分：短期重复经口染毒(28天)毒性试验； ——第11部分：短期重复经皮染毒(28天)毒性试验； ——第12部分：短期重复吸入染毒(28天)毒性试验； ——第13部分：亚慢性毒性试验； ——第14部分：细菌回复突变试验； ——第15部分：体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验； ——第16部分：体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验； ——第17部分：哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验； ——第18部分：啮齿类动物显性致死试验； ——第19部分：体外哺乳动物细胞染色体畸变试验； ——第20部分：体外哺乳动物细胞基因突变试验； ——第21部分：体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验； ——第22部分：体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验； ——第23部分：致畸试验； ——第24部分：两代繁殖毒性试验； ——第25部分：急性迟发性神经毒性试验； ——第26部分：慢性毒性试验； ——第27部分：致癌试验； ——第28部分：慢性毒性与致癌合并试验； ——第29部分：代谢和毒物动力学试验。 本部分为GB/T 15670的第12部分。 本部分按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本部分部分代替GB/T 15670—1995《农药登记毒理学试验方法》。 本部分与GB/T 15670—1995的亚急性吸入毒性试验部分相比，主要变化如下： ——本部分改命名为《短期重复吸入染毒(28天)毒性试验》； ——修改和调整了总体结构和编排格式； ——增加或细化了一些章节的内容(第1章、第2章、第3章、第5章、6.1.1、6.11 2、6.1.3、6.1.4、第7章和第8章)； ——修改了对实验动物的要求(见6.1.5，1995年版的10.3)； ——在反复吸入染毒暴露的实施描述之中，将染毒时间修改为：“除有特殊要求之外，一般每日吸入染毒6 h，每周7 d，连续染毒28 d。考虑到实际工作情况，也可每周染毒5 d”(见6.2.1.2，1995年版的10.6)。 本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： ——GB/T 15670—1995。 农药登记毒理学试验方法 第12部分：短期重复吸入染毒(28天) 毒性试验1 范围 GB/T 15670的本部分规定了短期重复吸入染毒(28天)毒性试验的基本原则、方法和要求。 本部分适用于为农药登记而进行的短期重复吸入染毒(28天)毒性试验。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 14925实验动物 环境及设施 3术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 短期重复吸入染毒毒性 short-term repeated dose inhalation toxicity 在短于实验动物寿命的10％期限内重复吸入受试物后所引起的健康损害效应。 3.2 吸入剂量 inhaled dose 动物单位体重所吸入受试物的量，即： (1) 式中： Dih——吸入剂量，单位为毫克每千克(mg/kg)； c——吸入气中受试物的浓度，单位为毫克每升(mg/L)； t——吸入持续时间，单位为分(min)； R——呼吸频率，单位为次每分(次/min)； Tv——受试动物的潮气量，单位为升每次(L/次)； α——与受试物反应性和溶解性相关的保持系数； W——体重，单位为千克(kg)。 3.3 未观察到有害作用剂量水平no observed adverse effect level：NOAEL 在规定的试验条件之下，用现有技术手段和检测指标，未观察到与染毒有关的有害效应的受试物最高剂量或浓度。 3.4 观察到有害作用最低剂量水平lowest observed adverse effect level；LOAEL 在规定的试验条件之下，用现有技术手段和检测指标，观察到与染毒有关的有害效应的受试物最低剂量或浓度。 3.5 蓄积毒性 cumulative toxicity 重复染毒引起的不良反应，是由于受试物对敏感组织作用的延续或该受试物和/或其代谢产物的浓度在敏感组织中增高的结果。 3.6 靶器官target organ 受试物引起机体出现显著毒性效应的器官。 3.7 空气动力学直径aerodynamic equivalent diameter；AD 描述气溶胶颗粒大小的专用术语。 将不同形状和密度的气溶胶颗粒与不同直径的标准单位密度(1.0 g/cm↑3)球形颗粒相对比，当它们的终端沉降速度相同时，就以该标准球形颗粒的直径表示此气溶胶颗粒的直径，并称之为该气溶胶颗粒的空气动力学直径，其计量单位为微米(μm)。 3.8 质量中值空气动力学直径mass median aerodynamic diameter；MMAD 由空气动力学直径大小不一的颗粒组成的气溶胶样品中，小于和等于某一空气动力学直径(例如5 μm)的颗粒占气溶胶样品总质量或总重量50％时，则该气溶胶颗粒空气动力学直径即为此气溶胶样品的质量中值空气动力学直径(5μm)。 3.9 几何标准差geometric standard deviation；GSD 气溶胶颗粒空气动力学直径的几何标准差，用以描述气溶胶颗粒大小的均一性或离散程度。几何标准差越小，含相似大小的颗粒比例越高，亦即气溶胶颗粒的均一性越好，离散度越低。通常，将几何标准差小于或等于2的气溶胶样品称为单相分散气溶胶。 3.10 可吸入颗粒直径inhalable diameter 通常将空气动力学直径在10μm以下的气溶胶颗粒物称为可吸入颗粒物，可吸入颗粒的空气动力学直径的大小简称为可吸入颗粒直径。 4试验目的 通过短期重复吸入染毒(28天)毒性试验，进一步了解受试物的吸入毒性特征和剂量-反应关系，获得毒性特征、作用靶器官、受试物是否具有蓄积毒性、未观察到有害作用剂量水平(NOAEL)、观察到有害作用最低剂量水平(LOAEL)等信息，为亚慢性和慢性毒性试验剂量和观察指标的选择提供依据。 5试验概述 将受试物制备成特定浓度的气态、蒸汽态、气溶胶或颗粒状物混悬态，以动式染毒系统短期重复染毒28 d，观察动物的中毒反应，定期称量体重和计算摄食量，并进行血液学指标、血液生化指标、组织病理学检查指标等的测定。以评价受试物的短期重复吸入毒性，初步确定受试物引起动物有害效应的剂量和靶器官。 6试验方法 6.1 试验准备 6.1.1 受试物 受试物应采用制备工艺稳定、符合质量标准规定的样品，注明名称、来源、批号、含量(或规格)、保存条件及配制方法等，并附有检验报告。所用赋形剂、溶剂或其他介质等均应标明批号、规格和生产厂家。 6.1.2 受试物气化或气溶胶制备方法选择与准备 6.1.2.1气态受试物 经流量计与空气混合成一定浓度之后，直接输入染毒柜。 6.1.2.2沸点较低易挥发的液态受试物 通过空气鼓泡或适当加热促使其挥发后，再与空气混合，通入染毒柜中。 6.1.2.3高沸点不易挥发液态受试物 根据受试物的理化特性，可以选取喷雾方法，或者利用气溶胶发生装置，制备符合试验要求的液体气溶胶再与一定量的空气混合输入至染毒柜中。 6.1.2.4粉状或固体受试物 利用气溶胶发生装置，将受试物制备成固体气溶胶，再与一定量的空气混合，通入染毒柜中。 6.1.3染毒方法 短期重复吸入染毒毒性试验应采用动式染毒方法。动式染毒是采用机械通风装置，连续不断地将含有一定浓度受试物的空气均匀地送入染毒柜，换气量大约为12次/h～15次/h，维持相对稳定的染毒浓度。采用全身暴露或头/鼻部暴露(nose/head-only exposure)方式每天对动物进行持续6 h的吸入性染毒。染毒时，染毒柜内染毒气体的分配保持均衡，氧含量不低于19％，CO2含量不高于3%，温度在(22±3)℃，相对湿度30％～70％(特殊情况，如蒸汽态染毒除外)。如果采用动物全身暴露的染毒方式，为确保染毒柜内空气稳定，应当注意使实验动物的总体积不超过染毒柜体积的5%。染毒柜内应维持微弱的负压，以防受试物泄漏污染周围环境。同时，应注意防止受试物爆炸。 6.1.4染毒系统可靠性的确定 吸入毒性试验中，应产生稳定浓度的气态、蒸汽态或气溶胶状态的受试物。其浓度应通过间断(至少每30 min采样一次)或连续采样，并通过适当的分析仪器，采用可靠的检测方法进行监控。 对于以气溶胶染毒方式进行的吸入毒性试验，除了分析染毒柜中的浓度之外，还应测定气溶胶颗粒的大小及其分散度。 在对染毒柜浓度进行的动态检测过程中，如果连续两次测定的结果能够证明染毒柜内受试物的浓度相对恒定，液态或气态农药及其制剂在设定吸入浓度的±10％，固态或干粉制剂制备的气溶胶在拟采用吸入浓度±20％的范围之内波动，则认为染毒系统对浓度的平衡和控制是成功的。否则，需要继续进行调试。如果是固态或干粉制剂制备的气溶胶，还需对其粒径进行连续测定和监控。通常要求所制备气溶胶的MMAD值在1 μm～4 μm范围内，且应达到连续两次测定的MMAD值的波动范围在10％之内，GSD应在1.5～3.0之间。 6.1.5实验动物的准备 6.1.5.1种属和体重 首选健康、初成年大鼠，不超过9周龄。实验动物个体体重相差不得超过同性别平均体重的±20％。选用其他动物需说明合适的理由。应使用具有质量合格证的实验动物。 6.1.5.2数量和性别 每组至少选用10只大鼠，雌雄各半。雌性动物应为未妊娠和未经产的。 6.1.5.3 饲养条件 正式试验之前，动物应在试验环境中检疫、适应3 d～5 d时间。 动物饲养条件应符合GB 14925的有关规定。每个浓度组的动物按性别分笼饲养，每笼动物数量以不干扰动物个体活动及观察反应为度。动物食用常规饲料，自由饮水。 6.1.5.4 吸入剂量的水平与动物分组 应至少设三个剂量组和一个对照组，对照组除不接受受试物之外，其他条件均与试验组相同。高吸入染毒剂量的设计应以引起动物明显毒性但不造成死亡为宜；低剂量应不出现毒性反应，若已知人群的可能接触水平，则低剂量应高于人群的实际接触水平；中间剂量应引起较轻的可观察到的毒性效应。若设立多个中间剂量组，则各组的染毒剂量应有适当的间隔，以保证引起不同程度的毒性效应。受试物具有爆炸性时，高剂量吸入染毒浓度应低于其爆炸限度。 也可以设立附加试验组，其吸入染毒的剂量和时间与高剂量组相同。附加试验组和附加对照组每组至少10只动物，雌雄各半。 如果染毒后动物出现严重的呼吸道刺激反应，则应降低受试物的浓度，尽管在这种情况下，由于高剂量组染毒浓度的降低，会导致其他毒性反应的明显下降或消失。如试验初期就出现严重的呼吸道刺激反应，应立即停止试验并以较低浓度进行新的试验。 必要时可进行限量试验。限量试验的浓度设置考虑以下因素：实际能够达到的最高浓度、最严重的人体暴露浓度、浓度的升高不利于维持染毒柜内的适宜氧气浓度等。 6.2试验步骤 6.2.1 吸入染毒的实施 6.2.1.1 染毒浓度的平衡与控制 采用试验准备阶段的各种适宜条件，对染毒浓度、可吸入颗粒直径等进行控制。 6.2.1.2反复吸入染毒暴露的实施 取已经在试验环境适应3 d～5 d的实验动物称重，然后放入染毒柜中开始染毒。除有特殊要求之外，一般应每日吸入染毒6 h，每周7 d，连续染毒28 d。考虑到实际工作情况，也可每周染毒5 d。 吸入染毒期间，应注意观察受试物对实验动物呼吸系统的影响，如呼吸道刺激反应，呼吸节律的变化，以及吸气和呼气模式的改变等。 6.2.2试验观察和检查 6.2.2.1 临床观察 观察期限为28 d，每天至少观察一次。必要时，可增加观察次数。 每只动物要有单独的观察记录，详细记录中毒表现和体征，包括中毒出现的时间、程度、持续时间和终止时间等。笼旁观察应包括但不限于以下内容：皮肤、被毛、眼和黏膜的改变，呼吸系统、循环系统、神经系统、肢体活动和行为方式等的变化。 对死亡动物应该及时进行解剖，对于濒死动物应及时处理。 附加组在停止吸入染毒之后需继续观察至少14 d，以了解毒性作用的可逆性、持续性和迟发效应。 6.2.2.2体重和摄食量记录 每周测体重一次，每周测量一次摄食量。 6.2.2.3血液学检查 试验结束时进行血液学指标的测定。测定指标至少包括血红蛋白浓度、红细胞数、血球压积、白细胞总数及分类、血小板数、凝血功能(凝血酶原时间和激活部分凝血活酶时间)。如果对血液系统有影响，应增加网织红细胞、骨髓涂片细胞学检查。 6.2.2.4血液生化检查 在试验结束时进行血液生化检查。测定指标至少包括丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血糖(GLU)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TCH)、钾、钠等，必要时测定γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、鸟氨酸脱羧酶(ODC)、甘油三酯、胆酸、胆碱酯酶、激素、钙和磷等指标。 6.2.2.5 尿液检查 一般不需要进行，只有当怀疑存在或观察到相关毒性作用时，才需要进行尿液检查，包括外观、比重、酸碱度、尿蛋白、葡萄糖和血细胞等。 6.2.2.6 病理检查 6.2.2.6.1 大体解剖检查 试验结束时应对所有动物进行大体检查，包括体表、颅腔、胸腔、腹腔及其脏器。剖取脑、脑垂体、心脏/主动脉、甲状腺和甲状旁腺、食道、肺/气管、胸腺、胃、十二指肠、小肠、大肠、肝、肾、脾、胰、肾上腺、卵巢、睾丸、附睾、有代表性的淋巴结、脊髓(颈、胸和腰段)、子宫、前列腺、膀胱、坐骨神经、胸骨进行固定。必要时(如果大体观察有病变)剖取乳腺、肌肉、股骨、泪腺、唾液腺、皮肤和眼球进行固定。并称取脑、心脏、胸腺、肾上腺、肝、肾、脾、睾丸、卵巢的重量，计算脏器系数。 6.2.2.6.2组织病理学检查 组织病理学检查的基本原则为： a)高剂量组和对照组大体解剖检查所有固定保留的器官和组织进行组织病理学检查； b)发现高剂量组病变后再对中、低剂量组相应器官和组织进行组织病理学检查； c)应对大体解剖检查肉眼可见的其他病变器官和组织进行组织病理学检查； d)染毒处理组有异常改变的，应对附加组动物相应的器官及组织进行组织病理学检查； e)试验过程中死亡或濒死动物，应对全部保留的组织和器官进行组织病理学检查。 6.2.2.7其他指标检查 必要时，根据受试物的性质及所观察的毒性反应，增加其他敏感指标的检查。 7试验结果和评价 7.1 试验结果 试验结果尽可能以表格形式总结和系统整理，并以适当的统计学方法进行处理，内容至少包括： a)按实验动物性别、分组等情况整理试验数据，如染毒动物的数量、出现中毒反应或死亡动物的数量，以及试验结束处死动物的数量等； b)中毒反应出现和消失的时间、动物死亡时间及其与染毒剂量间的关系； c)体重变化结果； d)摄食量的变化及其与体重变化的关系； e)血液学检查结果的陈述和总结； f)血液生化检查结果的陈述和总结； g)尿液检查结果(如果有)的陈述和总结； h)大体解剖的发现； i)组织病理的检查和发现，以及其他检查的结果等； j)统计学分析方法及各种效应的频数、发生率或均值及标准差的计算结果； k)有可能时绘出剂量-效应或剂量-反应曲线。 7.2结果的综合分析与评价 综合临床观察、临床检查、大体解剖、组织病理学检查的结果，对受试样品吸入28 d染毒有无毒作用及其毒作用特点，包括受试物的靶器官、蓄积毒性等做出初步评价；对是否需要进行更长时间的毒理学试验及其剂量和观察指标提出建议。如发现试验组与对照组有显著性差异或能得出剂量-效应或剂量-反应曲线时，应对未观察到有害作用剂量水平(NOAEL)和观察到有害作用最低剂量水平(LOAEL)做出初步评价。 8试验报告 试验报告至少应包括以下内容： a)试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号； b)试验委托单位名称和联系方式、样品受理日期和封样情况； c)试验开始和结束日期、试验项目负责人、试验单位技术负责人、签发日期； d)试验摘要； e)受试物名称、有效成分美国化学文摘登录号(CAS号)(如已知)、代码(如有)、纯度(或含量)、剂型、生产日期(批号)、理化性质、配制所用溶剂和方法； f)实验动物种属、品系、级别、数量、体重、性别、来源(供应商名称、实验动物质量合格证号、实验动物生产许可证号)，选择理由，检疫、适应情况，实验动物饲养环境，包括温度、相对湿度、饲料、单笼饲养或群饲、实验动物设施使用许可证号； g)剂量和组别，包括选择剂量的原则或依据、剂量和组别、动物分组方式和每组每种性别动物数； h)试验条件和方法，包括主要仪器设备、染毒途径、染毒方案、试验周期、观察指标等；针对吸入染毒的特点，重点描述染毒系统及其对温度、湿度、浓度、可吸入颗粒直径等的控制效果； i)试验结果：以文字描述和表格逐项进行汇总，包括临床中毒表现、体重等变化，大体解剖和组织病理学改变等，指出结果的统计处理方法； j)试验论：根据试验结果，对受试物的毒性效应和毒作用靶器官作出结论，获得未观察到有害作用剂量水平和观察到有害作用最低剂量水平，必要时对有关问题进行讨论； k)原始记录保存情况的说明。